简 介

MagIso Baterial DNA Isolation Kit是专门为华大制造、KingFisher, 达安、天隆等核酸提取仪设计的产品，适合于从细菌培养物中提取核酸。试剂盒基于超顺磁性的磁性粒子纯化技术，可最大程度减少交叉污染的风险，提高检测的灵敏度和准确度。仪器运行时间只需50分钟。得到的DNA可直接用于定量PCR和二代测序等实验。

组 成

Buffer MW1使用前要加入无水乙醇

保 存 条 件

Proteinase K -20^oC保存、 MagIsoBeads于2~8^oC保存，其他组份常温保存。

准 备 工 作

●     按标签所示，加入适量无水乙醇至Buffer MW1室温保存。

操作流程（手工）

1.       取细菌培养液1-5 ml，10,000 rpm(~11,500×g)离心1分钟，尽量吸净上清。

2.       向菌体沉淀中加入200μl Buffer BTL 缓冲液重悬，并加入20μl Lysozyme，混匀37℃孵育10-30min，期间颠倒离心管几次。注意：对于较易破壁的革兰氏阴性菌，用BTL重悬后可以不用溶菌酶处理，直接继续往下操作。

3.       加入20μl Proteinase K(20 mg/ml )与450μl Buffer MBL溶液混匀。70℃放置10 分钟，溶液应变清亮。

4.       加入20μl MagIso Beads，混匀，室温放置3-5分钟。

5.       转移至磁力架上，静置3~5分钟吸附磁珠。小心吸弃溶液。

6.       加入500ul Buffer MW1，涡旋混匀。（如果离心管盖等比较多裂解液残留，可将重悬液转置于新的离心管中）

7.       转移至磁力架上，静置2分钟吸附磁珠。小心吸弃溶液。

8.       加入700ul 75%乙醇，涡旋混匀15秒。

9.       转移至磁力架上，静置2分钟吸附磁珠。小心吸弃溶液。

10.    重复第8-9步一次。

11.    空气干燥7~10分钟。

注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥 太长时间，以免难以洗脱DNA。

12.    加50~100μl 预热至55^oC的Buffer TE或灭菌水等缓冲液，涡旋打散磁珠。静置3~5分钟，其间轻轻振荡1~2次加速DNA溶解。

13.    转移至磁力架上，静置3分钟。转移DNA溶液至新的1.5ml离心管中。